玫瑰属蔷薇科蔷薇属植物,不但具有一定的园林观赏价值,而且有较高的经济价值和药用价值。玫瑰常规以分株、压条、扦插等方法繁殖,繁殖率较低。现甘肃省庆阳县有一玫瑰生产基地开展研究建立玫瑰的快速繁殖体系,并为玫瑰的工厂化生产和规模化种植提供科学依据。
一、材料与研究方法
1.材料:以甘肃省陇东学院校园内栽培的玫瑰为材料。
2.研究方法:以MS或1/2MS为基本培养基,附加不同浓度的6-BA、IAA、IBA、NAA等,蔗糖3%(为了降低成本,蔗糖均用市售白砂糖代替),琼脂0.35%,pH5.8,培养温度为25℃,光照时间每天12小时,光照强度约1500 lx。将启动培养基上腋芽长出的无根苗剪成单芽茎段,转入不定芽诱导培养基上,诱导不定芽产生;不定芽继代周期为5周,增殖培养时将不定芽块切割成小芽块转至增殖培养基中,每100毫升培养瓶中接种3个芽块;生根前将较弱的无效苗转入壮苗培养基中促使苗健壮;生根培养时将高约3厘米左右的芽剪下插入生根培养基,生根苗移栽采用“二步法”。
二、结果与分析
1.无性系的建立。2005年6月从该院校园栽培的植株上取生长健壮的半木质化枝条,依常规方法灭菌处理后,剪成茎尖和带腋芽茎段,接种于无性系建立培养基上。20天后统计实验结果显示,就无性系建立而言,基本培养基MS比1/2MS效果好,在基本培养基中附加每升0.5毫克的6-BA和每升0.05毫克NAA,有利于愈伤组织的诱导和芽的萌生,愈伤组织诱导率可达76.5%,萌芽率为52.9%,且芽生长健壮。
2.不定芽的诱导。将无性系幼茎切成单芽茎段,分别接种在不定芽诱导培养基上,结果表明,以MS为基本培养基,附加每升1~3毫克的6-BA和每升0.1~0.5毫克的NAA,均可高频诱导产生不定芽,当6-BA以较高浓度(每升2~3毫克)与NAA配合使用时,芽诱导率均为100%,产生的不定芽数量多,但茎不伸长,均为叶片,长势弱;较低浓度6-BA(每升1毫克)与每升0.1毫克NAA配合使用,虽然不定芽诱导率下降,但芽长势良好。说明MS附加较低浓度的6-BA与NAA利于玫瑰不定芽诱导与生长。同时发现,诱导产生的包埋于培养基中的不定芽长势最好,可能与其充分吸收营养有关。
3.芽的继代增殖培养及有效苗的产生。将产生的不定芽块切割成小芽丛进行继代增殖培养,增殖培养基为 MS+6-BA每升0.3毫克+NAA每升0.05毫克,继代周期为5周。在此培养基上,玫瑰仍以不定芽方式增殖,且大部分不定芽明显增高,叶片展开,长势较好。每100毫升培养瓶接种3个芽块(约35个芽),经过一个继代周期培养,芽总数达132个,增殖系数为3.77。其中,高度在3厘米左右,能用于生根的有效苗的比率为43%,将较矮、长势弱的无效苗剪下,转到1/2 MS壮苗培养基上,培养20天左右,芽苗明显长高、健壮,叶片舒展,叶色浓绿,可用于生根。
4.激素浓度对生根的影响。将增殖培养基上高度在3厘米左右的芽剪下,与壮苗后的芽一起插入生根培养基中诱导生根。结果显示,玫瑰为难生根植物,不同培养基和激素浓度对玫瑰生根的影响差异较大。培养基中无机离子强度对玫瑰生根有明显影响,无机离子减半(1/2MS)有利于生根。单独附加每升0.2~0.5毫克的IAA、IBA或NAA对根的产生及根的生长均有促进作用。每升0.2~0.5毫克的IAA与每升0.2~0.5毫克IBA配合使用,生根率明显提高,平均为38.6%,且切口端愈伤化程度低,产生的根短而粗壮,利于移栽;IAA、IBA、 NAA三者配合使用,生根效果最佳,生根率最高达76.3%,产生的根粗壮、数量多,便于移栽成活。筛选出最佳生根培养基为1/2MS+每升IAA0.5毫克+每升IBA0.5毫克+每升 NAA0.2毫克。
5.炼苗与移栽。将生根的组培苗在室内打开瓶盖炼苗2~3天后,在自来水中洗净根部培养基,移入珍珠岩苗床,外搭塑料拱棚及遮阳网,控制光照度在5000~10000 lx以内,温度在15℃~35℃,湿度在85%以上,每周喷1次10%的MS大量元素营养液,2周后逐渐打开小拱棚,增加光照,4周后,便可进行常规管理。此法移栽,成活率可达94.3%。
三、小结
试验结果表明,适合玫瑰不定芽诱导的培养基为 MS+6-BA每升1.0毫克+NAA每升0.1毫克;适合芽增殖的培养基为MS+6-BA每升0.3毫克+NAA每升0.05毫克,在此培养基上芽的增殖系数为3.77,可直接用于生根的有效苗的比率为43%;适合芽生根的培养基为1/2MS+IAA每升0.5毫克+IBA每升0.5毫克+NAA每升0.2毫克,在此培养基上芽的生根率为76.3%。生根苗炼苗后以珍珠岩作基质,移栽成活率为94.3%。据计算,当增殖系数为3.77、生根率为76.3%、移栽成活率为94.3%时,1个芽经1年10代培养,可产生约58万个芽,考虑到生产设施及人力等因素的限制,如此多的芽不可能一次全部生根,导致无法处理,甚至倒苗。因此,在实际生产中,如果从第7代开始将高度在3厘米左右43%芽进行生根与移栽,则1年可由1个芽生产3349株商品苗;同样,如果从第8代开始,1年1个芽可生产12,000余株商品苗。这样,对降低成本、提高效益是十分必要的。 |